DOT-Elisa for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluid using a new solid phase (resin-treated polyester fabric) and Cysticercus longicollis antigens

Foi desenvolvido o teste dot-Elisa para deteccao de anticorpos em liquido cefalorraquiano (LCR) no diagnostico imunologico da neurocisticercose humana, utilizando antigenos de membrana e escolex de Cysticercus cellulose (M+E-Cc) e, alternativamente, membrana (M) e liquido vesicular (LV) de Cysticercus longicollis (Cl) covalentemente ligados a um novo suporte constituido de tecido de poliester-resina de N-metilolacrilamida (dot-TR). O teste foi realizado a temperatura ambiente, com tempos de incubacao reduzidos e sem necessidade de cuidados na manipulacao do suporte...

Schistosoma mansoni circulating polysaccharide and protein antigens recognized by sheep antisera in patients with different clinical forms of schistosomiasis before and after treatment

Dois antissoros produzidos em carneiros, um dos quais contra a fracao polissacaridica (Po) e outro contra componentes proteicos (Pt) de vermes adultos de Schistosoma mansoni, foram avaliados quanto ao seu desempenho na deteccao de antigenos parasitarios circulantes em pacientes com diferentes formas ciclicas da esquistossomose mansonica, atraves de um ensaio imunoenzimatico, (ELISA). O primeiro antissoro revelava antigenos parasitarios no granuloma hepatico e o segundo, nos glomerulos renais de pacientes com esquistossomose mansonica, bem como em camundongos experimentalmente infectados pelo S. mansoni....

Observacoes relativas a acao do itraconazol sobre o Toxoplasma gondii / Observations relating to the itraconazole activity against Toxoplasma gondii

Com o intuito de melhor conhecer o espectro de acao terapeutica do itraconazol, um novo composto triazolico, foi analisada sua eventual acao sobre o Toxoplasma gondii, atraves de observacoes "in vitro" e "in vivo", na infeccao experimental de camundongos. O estudo teve tambem interesse em aprimorar o tratamento da toxoplasmose quanto a inocuidade e a facilidade de execucao. O presente experimento nao mostrou atividade "in vivo" ou "in vitro" do itraconazol na infeccao experimental pelo Toxoplasma gondii em camundongos diversamente do observado em pesquisa previa, em relacao ao Trypanosoma cruzi.

A reaçåo imunoenzimática para cisticercose no líquido cefalorraquiano: consideraçöes sobre o limiar de reatividade / Immunoenzymatic assay for spinal fluid neurocysticercosis: cut off considerations

Um teste imunenzimático (ELISA) para neurocistercercose foi realizado em 335 amostras de líquidos cefalorraquianos (LCR), sendo 132 normais (LN), 115 com alteraçöes näo decorrentes de neurocisticercose (LA) e 88 obtidas de pacientes com neurocisticercose (LC). O limiar de reatividade (LR) foi determinado pela média aritmética das densidades ópticas (DO) das amostras LA acrescidas de 2 desvios padräo (sd). O teste ELISA apresentou sensibilidade de 97,7 por cento e especificidade de 96,4 por cento. Os valores de sensibilidade encontrados para as reaçöes de imunofluorescência indireta, fixaçäo de complemento e hemaglutinaçåo foram, respectivamente, de 80,7 por cento, 69,3 por cento e 62,5 por cento. A associaçäo do teste ELISA e a reaçäo de fixaçäo de complemento forneceu sensibilidade de 100 por cento. Näo houve correlaçäo entre as densidades ópticas do teste ELISA e os níveis de proteínas totais de amostras, tanto no grupo LA (r= -0,02), como no LC (r= -0,07).

Dot-elisa for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics): preliminary report

Foi desenvolvido o teste DOT-ELISA em tecido de poliéster tratado com resina polimerizada(NMA) para o imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC) humana pesquisando anticorpos específicos em líquido cefalorraquiano (LCR). O teste pode ser empregado em levantamentos epidemiológicos e em laboratórios de média e baixa complexidade, já que todas as etapas säo realizadas a temperatura ambiente, o antígeno é covalentemente ligado ao suporte permitindo obter um reagente estável, e o suporte sensibilizado näo requer cuidados especiais no seu manuseio. Foram ensaidas 30 amostras de LCR; todas as 15 amostras do grupo controle foram negativas e 14 (93,3%) das 15 amostras de LCR do grupo de pacientes com NC foram positivas (títulos de 1 a 128). Os estudos de sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade, establidade e padronizaçäo do uso de soro como amostra estäo em andamento

Chaga's disease: IgA, IgM and IgG antibodies to T. cruzi amastigote, trypomastigote and epimastigote antigens in acute and in different chronic forms of the disease

Com o intúito de se aperfeiçoar o diagnóstico sorológico das diferentes formas clínicas da doença de Chagas, foram estudados antígenos de formas amastigotas e tripomastigota, obtidas de camundongos imunossuprimidos infectados com cepa Y de T. cruzi, em comparaçäo com o de epimastigota convencionalmente utilizado. Um total de 506 amostras de soro de pacientes chagásicos com formas aguda e crônicas (indeterminada, cardíaca e digestiva), de indivíduos com infecçöes näo relacionadas e de indivíduos sadios foi analisado por reaçäo de imunofluorescência, para detecçäo de anticorpos IgG, IgM e IgA. O antígeno de amastigota apresentou os mais altos índices de eficiência relativa em testes de IF IgG (0,946), IF IgM (0,871) e IF IgA (0,914), mostrando ser mais conveniente para a finalidade proposta. Anticorpos anti-amastigota apresentaram médias geométricas de títulos mais altas que anti-tripomastigota e anti-epimastigota. Anticorpos IgG anti-corpos IgG anti-amastigota foram encontrados em todas as formas clínicas da doença de Chagas, e anticorpos IgA foram encontrados predominantemente em formas crônicas digestivas e em formas agudas, além de anticorpos IgM nestas últimas formas. Portanto, testes com antígeno amastigotas poderiam ser úteis para a triagem de indivíduos chagásicos em bancos de sangue. Aspectos práticos e econômicos na obtençäo de amastigotas, conforme descrito neste trabalho favorecem seu uso em países em desenvolvimento, já que o antígeno obtido por meio de outras fontes requer uma infraestrutura mais complexa, equipamentos e pessoal especializados

A sífilis avança: progride o diagnóstico? / The syphilis advance: will the diagnosis progress?

A sorologia da sífilis tem como alicerce os testes de cardiolipina, mas estes precisam ser realizados segundo técnica rigorosa e com reagentes bem padronizados. As evidências indicam que em nosso país tais exigências com freqüência näo säo cumpridas, impondo-se com urgência um sistema de controle de qualidade. Pelas limitaçöes de sensibilidade e, principalmente, de especificidade, os testes de cardiolipina devem ser complementados por testes treponêmicos. Destes, o mais divulgado é o teste de imunofluorescência FTA-ABS, mas a confiabilidade de seus resultados depende de rigorosa padronizaçäo no laboratório, da experiência técnica do laboratorista que o executa e da qualidade dos reagentes utilizados. O teste de hemaglutinaçäo tem valor comparável ao teste de imunofluorescência com a vantagem de padronizaçäo mais fácil, desde que os reagentes já säo fornecidos devidamente estandardizados e de ser de execuçäo mais simples. Porém, é preciso sublinhar que os testes sorológicos näo fornecem o diagnóstico, mas seus resultados têm apenas valor de probabilidade, que varia segundo diferentes fatores. Assim, esses resultados precisam ser ponderados e adequadamente valorizados pelo médico, de acordo, com dados clínicos, epidemiológicos, etc. Discute-se a interpretaçäo de resultados dos testes e apresenta-se um algorítmo para sua adequada utilizaçäo. Os novos testes treponêmicos para anticorpos IgM vieram abrir perspectivas para a identificaçäo de sífilis em atividade, recente ou tardia, para o diagnóstico de reinfecçöes e para avaliaçäo de resultados terapêuticos. Sua utilizaçäo na clínica está na dependência de maior simplificaçäo técnica e reduçäo de custos, o que se pode esperar para breve

Lectins for the detection of IgM antibodies to T. gondii in the diagnosis of acute toxoplasmosis by immunofluorescence test

Lectinas foram marcadas com fluoresceína e testadas na reaçäo de imunofluoresceína e testadas na reaçäo de imunofluorescência para a detecçäo de anticorpos anti-T. gondii, no diagnóstico da toxoplasmose aguda. Neste estudo tentou-se encontrar reagentes alternativos para conjugados fluorescentes anti-IgM humano (CFAIgMH), que com freqüência contém anticorpos antitoxoplasma, como contaminantes, devido às infecçöes naturais por T. gondii, entre os animais utilizados para imunizaçäo. Conjugados fluorescentes de lectina de lentilha (CFL) (Lens culinaris) forneceram resultados satisfatórios. Avaliaçäo do CFL efetuada em total de 179 amostras de soros de pacientes com toxoplasmose aguda e crônica, com infecçöes näo relacionadas e de indivíduos sadios, mostrou valores altos nos índices de eficiência relativa, co-positividade e co-negatividade, respectivamente de 0,989, 0,969 e 1,000, em relaçäo ao CFFAIgMH convencional. Além disso, três partidas de CFL preparadas sucessivamente forneceram resultados reprodutíveis. A vantagem de se empregar o LFC como reagente alternativo no diagnóstico sorológico da toxoplasmose aguda consiste nos aspectos práticos da sua preparaçäo

Normalización del diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas en las Américas: evaluación de tres años de colaboración / The standardization of Chagas' disease serodiagnosis in the America: evaluation of 3 years of collaboration

En 1981, se inició en la Argentina, el Brasil y los Estados Unidos de América un estudio en colaboración con el propósito de establecer un programa continental de normalización del diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas. Con dos conjuntos de muestras de suero, uno reunido en la Argentina y el otro en el Brasil, en un laboratorio de cada uno de los tres países se efectuaron pruebas serológicas empleando los procedimientos y reactivos ordinariamente usados en esos laboratorios. Se estableció una técnica para facilitar el intercambio de muestras de suero. Luego se realizó una segunda serie de pruebas siguiendo protocolos uniformes. Estas pruebas, con un conjunto de muestras de suero provenientes de sujetos aparentemente infectados y no infectados, incluyeron una prueba de hemaglutinación en la cual los tres laboratorios utilizaron el mismo reactivo comercial. A estos dos estudios siguió una tercera serie de pruebas en las que se empleó un conjunto de muestras de suero de sujetos infectados con T. cruzi y de personas no infectadas, de acuerdo con un diagnóstico con un alto grado de probabilid, basado en datos clínicos, parasitológicos y epidemiológicos. Otros cuatro laboratorios de Bolivia, Colombia, Chile y Panamá participaron en este tercer estudio. Los resultados de la primera serie de pruebas reflejaron notables diferencias en cuanto a la reactividad de las diversas pruebas serológicas y también en los criterios usados para computar los sueros como positivos o negativos. En el segundo estudio fue algo mayor la coincidencia entre los resultados de los tres laboratorios y se demostró que, variando las titulaciones límites usadas para definir si un determinado suero era positivo o negativo, se podía lograr una...

Diagrama de verificacion para evaluar reactivos de hemaglutinacion usados en el diagnostico de la enfermedad de Chagas / A control chart method for evaluating hemagglutination reagent used in Chagas' disease diagnosis

Se describe la tecnica del diagrama de verificacion, menos complicada y mas apta que la tecnica de analisis secuencial para evaluar lotes pequenos de reactivo. En este método se necesitan un reactivo de referencia, un conjunto de alrededor de 20 muestras de suero y un limite establecido de la varianza que, cuando es sobrepasado, determina el rechazo del lote puesto a prueba. La mitad de las muestras de suero deben ser reactivas con respecto al antigeno de Trypanosoma cruzi y la otra mitad deben ser no reactivas; los sueros reactivos tienen que ser utiles en el sentido que su respuesta ante un reactivo de buena calidad (como el de referencia) es distinta de la que manifiestan ante un mal reactivo. Con este procedimiento, el reactivo de referencia y el reactivo que se quiere evaluar se ponen a prueba con el conjunto de muestras de suero; se observan las diferencias entre los titulos obtenidos con los dos reactivos y se calcula la desviacion estandar promedio. Cuando esta es inferior al limite de verificacion previamente establecido, el lote de reactivo es aceptado; si supera el limite, se rechaza el lote. La experiencia del Laboratorio de Inmunologia del Instituto de Medicina Tropical de Sao Paulo, Brasil, ha demostrado que los sueros que producen titulos relativamente altos pueden usarse para detectar reactivos de mala calidad, y que es eficaz la conservacion de los sueros en un volumen igual de glicerina, almacenados a -20 °C

Serological survey for research of visceral leishmaniasis in an urban dog population of the municipality of Sao Paulo, Brazil (1979-1982)

Relatam-se os resultados de inquérito sorológico em 968 cäes errantes capturados nas proximidades de reservas florestais do Município de Säo Paulo, no período de 1979 - 1982, no qual foram realizados testes de imunofluorescência indireta com Leishmania donovani. A pesquisa está relacionada à descoberta em 1978 de um primeiro caso humano autócne de leishmaniose visceral no Município. Nenhum dos cäes apresentou título > ou igual 80 com Leishmania donovani, mas 10 de 389 animais examinados mostraram título > ou igual 80 com Leishmania braziliensis. Os resultados foram discutidos tendo em vista outros dados da estrutura epidemiológica local